【知識(shí)課堂】色譜分析中的樣品前處理 不可忽視！
知識(shí)課堂】色譜分析中的樣品前處理 不可忽視！
色譜分析已成為當(dāng)今分析化學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛的一種分析測試手段，應(yīng)用范圍涉及醫(yī)藥、環(huán)保、生命科學(xué)、石油化工等幾乎所有基礎(chǔ)和研究領(lǐng)域。由于色譜分析常常用于各種復(fù)雜的基體以及低含量組分的分析，消除基體干擾，提高分析靈敏度，延長儀器壽命是一個(gè)普遍需要解決的問題，因此，對樣品進(jìn)行色譜分析前處理變得非常重要。使用色譜對復(fù)雜基體進(jìn)行分析時(shí)的樣品前處理步驟往往繁瑣耗時(shí),易引起誤差,已成為制約分析效率和準(zhǔn)確度提升的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，雖然分析儀器的自動(dòng)化程度日益提高，但在發(fā)展分析方法的同時(shí)，人們或多或少忽視了樣品的預(yù)處理問題。然而在分析復(fù)雜樣品，如生物樣品、環(huán)境樣品、植物樣品等，為了獲得比較可靠的鑒定結(jié)果,必須花費(fèi)很多的人力和經(jīng)費(fèi)，并且由于前處理步驟多，如果前處理不當(dāng)，往往會(huì)使全過程的回收率降低，會(huì)發(fā)生定性定量錯(cuò)誤和色譜柱壽命縮短等問題．因此，提高和掌握樣品的前處理技術(shù)是完善檢測全過程的重要環(huán)節(jié)。
一、高效液相色譜分析為例
高效液相色譜分析樣品時(shí)沒有統(tǒng)一的前處理方法。必須根據(jù)樣品的種類和待測項(xiàng)目決定前處理方案，但原則上仍應(yīng)考慮幾下操作環(huán)節(jié)：如取樣、試樣的調(diào)制、提取、純化、濃縮等步驟，至于各種具體樣品的前處理可以進(jìn)一步參考有關(guān)資料。
迄今為止，樣品前處理的方法很多，本質(zhì)上可分為兩大類：
一類是對檢測器響應(yīng)弱(或無信號(hào))的樣品，通過衍生技術(shù)改變其物理和化學(xué)性質(zhì)，使之成為可被檢測的化合物。另一類是通過對復(fù)雜基體樣品中低含量組分進(jìn)行分離、純化和富集以獲得同樣效果。
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1.1前處理的必要性：
①去除基體中干擾樣品分析的雜質(zhì)，提高分析精度和分離效果；
②提高被測定化合物檢測靈敏度；
③提高樣品與流動(dòng)相的兼容性，從而改善 定性定量分析的重復(fù)性．
④增加選擇性；
⑤減少停機(jī)概率；
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1.2樣品前處條件：
①過程簡單；
②處理速度快速；
③使用裝置要?。?/span>
④引進(jìn)誤差要??；
⑤對目標(biāo)物有高選擇性；
⑥有較高回收率；
⑦且綠色環(huán)保。
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1.3以下是氣相色譜常用樣品前處理技術(shù)
①溶劑萃?。?/span>
②固相萃??；
③超臨界萃?。?/span>
④衍生化；
⑤膜分離；
⑥蒸餾；
⑦吸附。
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1.4常規(guī)萃取的兩種模式
①液液萃取：分流漏斗；
②液氣萃取（溶液吸收）：對氣態(tài)、樣品蒸汽及氣溶膠等中的樣品進(jìn)行吸附。
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1.5蒸餾
分類：水蒸汽蒸餾、減壓蒸餾、分餾。
應(yīng)用：草藥中植物油、奶產(chǎn)品中有機(jī)體氯污染物、環(huán)境樣品中揮發(fā)性有機(jī)物。
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1.6關(guān)于固相萃取
1.6.1步驟：活化吸附劑→反相萃取柱用水溶性有機(jī)溶劑→正相萃取柱用目標(biāo)化合物溶劑。
1.6.2分類：
正相：萃取極性化合物；
反相：萃取中等極性到非極性化合物；
離子交換萃?。何綆в须姾傻幕衔?；
1.6.3萃取柱的選擇：
盡量選擇與目標(biāo)化合物極性相似的吸附劑；
樣品溶劑的強(qiáng)度相對該吸附劑應(yīng)該較弱。
1.6.4上樣
通過抽真空、加壓或離心的方法使樣品進(jìn)入吸附劑
1.6.5洗滌和洗脫
先用弱溶劑洗干擾物，再用較強(qiáng)的溶劑洗目標(biāo)化合物；也有的將干擾物吸附在柱上而目標(biāo)物直接流出進(jìn)行收集。
1.6.6固相萃取主要應(yīng)用：
復(fù)雜樣品中微量或痕量化合物的分離和富集。如：生物體液，中藥物及其代謝產(chǎn)物，食品有效成分或有害成分分析，環(huán)保水樣中各種污染物的分析。
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1.7固相微萃?。⊿PE）
優(yōu)點(diǎn)：操作時(shí)間短、樣品量小、無需萃取溶劑、適于揮發(fā)及非揮發(fā)性物質(zhì)、重現(xiàn)性好。
關(guān)鍵：萃取頭涂層選擇，其原則是極性涂層適合于極性化合物，非極性涂層適合于非極性化合物。
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1.8氣體萃?。斂占夹g(shù)）
分類：靜態(tài)頂空和動(dòng)態(tài)頂空。
優(yōu)點(diǎn)：操作簡單、可自動(dòng)化、可變條件多、靈敏度高。
衍生化技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：將一些物質(zhì)通過衍生轉(zhuǎn)化為可被色譜測定的物質(zhì)；提高檢測靈敏度；改變化合物色譜性能，改善分離度；衍生化可以幫助進(jìn)行化合結(jié)構(gòu)簽定。
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1.9衍生化技術(shù)
柱前衍生的應(yīng)滿足的條件：
1）反應(yīng)能迅速、定量的進(jìn)行，反應(yīng)重復(fù)性好，反應(yīng)條件不苛刻，容易操作；
2）反應(yīng)的選擇性高，最好只與目標(biāo)化合物反應(yīng)，即反應(yīng)的專一性；
3）衍生化反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，反應(yīng) 副產(chǎn)物和過量的衍生化試劑應(yīng)不干擾目標(biāo)化合物的分離與檢測；
4）衍生化試劑應(yīng)方便易得，通用性好。
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2.0針對不同形態(tài)樣品，農(nóng)殘的提取方法有何不同？
2.0.1.水樣：
對非極性殘留，用非極性溶劑直接萃取；對弱極性的殘留，可以按如下步驟：
1）增加提取劑的量；
2）選用極性稍強(qiáng)溶劑如乙酸乙酯；
3）在水中加入氯化鈉，使其鹽析出來；
4）調(diào)整溶液PH：如分析物是酸性的，調(diào)PH至3左右；如分析物是胺，用氨水調(diào)PH至10左右。
2.0.2植物和動(dòng)物樣品
一般采用溶劑提取法，如振蕩法、組織搗碎法。提取溶劑一般可用水溶性的乙腈、丙酮、甲醇等?？梢詼p少脂類物質(zhì)。
2.0.3土壤樣品
用水將樣品濕潤（含水量約5%），然后用強(qiáng)極性溶劑或混合溶劑進(jìn)行提取，較多使用振蕩法、索氏提取法。百草枯及其聯(lián)吡啶除草劑提取時(shí)用強(qiáng)酸消化處理。
2.0.4樣品濃縮：減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、K-D濃縮法、氮吹法。
為了提高被測物在溶液中的濃度，提高檢出率，提取液經(jīng)純化以后均進(jìn)行蒸發(fā)濃縮。目前最常用的濃縮方法：把經(jīng)過純化后的溶液轉(zhuǎn)移至園底燒瓶內(nèi)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在一定溫度的水浴中減壓濃縮至一定量，經(jīng)每分鐘5000轉(zhuǎn)的離心機(jī)離心5分鐘，取上清液液用于液相分析，也可用0.45m濾膜過濾，濾液即可用于分析。柱層析法除了純化樣品的作用外，尚可將被測物吸附濃縮。
2.0.5常用凈化技術(shù)：
柱層析法：弗羅里硅土柱、氧化鋁柱、硅膠柱、活性炭柱；
液液分配法：即利用農(nóng)藥在不同溶劑中溶解差異分離；
沉淀凈化法；
化學(xué)凈化法。
2.0.6凈化方法中的一些問題
提取液在凈化前，必須對待測化合物的一些重要的物理性質(zhì)有所了解，如在有機(jī)溶劑和水中的溶解性；酸性；穩(wěn)定性；蒸氣壓；熔點(diǎn)，沸點(diǎn)，極性。
SEP—PAK預(yù)處理柱--應(yīng)用于樣品的純化及痕量濃縮等方面。
不可,樣品,萃取,化合物,處理,分析,極性,溶劑,text,進(jìn)行
